Recombinant DNA
Wat is recombinant DNA:
Recombinant DNA zijn DNA- moleculen die DNA-fragmenten hebben die zijn afgeleid van twee of meer bronnen, meestal van verschillende soorten.
Moleculaire klonen is de centrale techniek van de recombinante DNA-methodologie en bestaat uit de overdracht van een gen van het ene organisme naar het andere, dat wil zeggen, de recombinatie van DNA uit verschillende bronnen.
Recombinante DNA-technologie
De procedure omvat in het algemeen het isoleren van een menselijk gen met therapeutisch potentieel (bijvoorbeeld insuline) en het introduceren van dat gen in een dierlijke, bacteriële of gistcel.
Door het gebruik van eiwitten die restrictie-enzymen worden genoemd, worden individuele genen uit menselijk DNA geïsoleerd en ingevoegd in kleine stukjes DNA, geknipt met hetzelfde enzym, plasmiden genoemd .
Het recombinante plasmide wordt vervolgens in een cel van een dier, bacterie of gist ingevoegd, in een proces dat transformatie wordt genoemd.
Geneesmiddelresistentiegenen, die ook in het plasmide worden gevonden, selecteren getransformeerde cellen van de niet-getransformeerde cellen.
Een zuivere populatie van recombinante cellen wordt vervolgens tot stand gebracht door middel van het kloneringsproces, waarbij een geselecteerde enkele cel aanleiding zal geven tot een populatie van klonen.
Aan het einde van het proces wordt verwacht dat alle resulterende cellen één kopie van het plasmide bevatten dat het ingevoegde humane gen draagt.
Zodra het gen en de gekloneerde cel zijn ingebracht, worden de cellen vervolgens geïnduceerd om het menselijke gen tot expressie te brengen.
Toepassingen van Recombinant DNA-technologie
- Productie van nuttige stoffen zoals humane insuline, groeihormoon, vaccins, industriële enzymen;
- Replicatie- en genexpressiemechanismen;
- Vaderschapsonderzoek;
- Diagnose van genetische en infectieziekten;
- Gentherapie;
- Transgenen.
Meer informatie over eiwitten.
